論文

Mesenchymal stem cells (MSCs) are defined as cells that undergo sustained in vitro growth and can give rise to multiple mesenchymal lineages. Because MSCs have only been isolated from tissue in culture, the equivalent cells have not been identified in vivo and little is known about their physiological roles or even their exact tissue location. In this study, we used phenotypic, morphological, and functional criteria to identify and prospectively isolate a subset of MSCs (PDGFRα+Sca-1+CD45 -TER119-) from adult mouse bone marrow. Individual MSCs generated colonies at a high frequency and could differentiate into hematopoietic niche cells, osteoblasts, and adipocytes after in vivo transplantation. Naive MSCs resided in the perivascular region in a quiescent state. This study provides the useful method needed to identify MSCs as defined in vivo entities. © 2009 Morikawa et al.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are a heterogeneous subset of stromal stem cells isolated from many adult tissues. Previous studies reported that MSCs can differentiate to both mesodermal and neural lineages by a phenomenon referred to as ''dedifferentiation'' or ''transdifferentiation''. However, since MSCs have only been defined in vitro, much of their development in vivo is still unknown. Here, we prospectively identified MSCs in the bone marrow from adult transgenic mice encoding neural crest-specific P0-Cre/Floxed-EGFP and Wnt1-Cre/Floxed-EGFP. EGFP-positive MSCs formed spheres that expressed neural crest stem cell genes and differentiated into neurons, glial cells, and myofibroblasts. Interestingly, we observed MSCs both in the GFP+ and GFP- fraction and found that there were no significant differences in the in vitro characteristics between these two populations. Our results suggest that MSCs in adult bone marrow have at least two developmental origins, one of which is the neural crest. © 2009 Elsevier Inc. All rights reserved.

新鮮骨髄(BM)細胞のCD271発現パターンを調べ、線維芽細胞コロニー形成単位(CFU-F)を分析し、CD271が、標記分離・同定のマーカーにもなるか否か検討した。共発現分析の結果、CD271細胞はCD133にも陽性を示した。CD271+CD133+サブセットを分離後、CD271+CD133+画分において殆ど独占的にコロニー形成能が存在することが示された。BMから直接分離されたCD271+CD133+は高度に濃縮されたCFU-Fの個体群で、14日間培養後未分画細胞の720倍のコロニー数を示した。これら細胞は、脂質、骨細胞へと分化し、多系統分化能が示唆された。以上より、CD271とCD133は、標記分離に有用であることが示された。本細胞は脊髄損傷、軟骨修復、心筋梗塞等の疾患における移植のために使用し得ると考えられた。

Adipocyte differentiation requires a well-defined programme of gene expression in which the transcription factor C/EBPα (CCAAT/enhancer- binding protein) has a central function. Here, we show that Hzf (haematopoietic zinc-finger), a previously identified p53 transcriptional target, regulates C/EBPα expression. Hzf is induced during differentiation of preadipocyte cell lines, and its suppression by short hairpin RNA disrupts adipogenesis. In Hzf's absence, expression of C/EBPα is severely impaired because of reduced translation of its mRNA. Hzf physically interacts with the 3′ untranslated region of C/EBPα mRNA to enhance its translation. Taken together, these findings underscore a critical role of Hzf in the adipogenesis regulatory cascade. © 2008 European Molecular Biology Organization | All Rights Reserved.

Although recent reports have described multipotent, self-renewing, neural crest-derived stem cells (NCSCs), the NCSCs in various adult rodent tissues have not been well characterized or compared. Here we identified NCSCs in the bone marrow (BM), dorsal root ganglia, and whisker pad and prospectively isolated them from adult transgenic mice encoding neural crest-specific P0-Cre/Floxed-EGFP and Wnt1-Cre/Floxed-EGFP. Cultured EGFP-positive cells formed neurosphere-like structures that expressed NCSC genes and could differentiate into neurons, glial cells, and myofibroblasts, but the frequency of the cell types was tissue source dependent. Interestingly, we observed NCSCs in the aorta-gonad-mesonephros region, circulating blood, and liver at the embryonic stage, suggesting that NCSCs migrate through the bloodstream to the BM and providing an explanation for how neural cells are generated from the BM. The identification of NCSCs in accessible adult tissue provides a new potential source for autologous cell therapy after nerve injury or disease. © 2008 Elsevier Inc. All rights reserved.

Mesenchymal stem cells (MSC), a distinct type of adult stem cell, are easy to isolate, culture, and manipulate in ex vivo culture. These cells have great plasticity and potential for therapeutic application, but their properties are poorly understood because of their low frequency and the lack of knowledge on cell surface markers and their location of origin. The present study was designed to address the undefined lineage relationship of hematopoietic and mesenchymal stem cells. Genetically marked, highly purified hematopoietic stem cells (HSCs) were transplanted into wild-type animals and, after bone marrow repopulation, the progeny were rigorously investigated for differentiation potential into mesenchymal tissues by analyzing in vitro differentiation into mesenchymal tissues. None/very little of the hematopoietic cells contributed to colony-forming units fibroblast activity and mesenchymal cell differentiation; however, unfractionated bone marrow cells resulted in extensive replacement of not only hematopoietic cells but also mesenchymal cells, including MSCs. As a result, we concluded that purified HSCs have no significant potency to differentiate into mesenchymal lineage. The data strongly suggest that hematopoietic cells and mesenchymal lineage cells are derived from individual lineage-specific stem cells. In addition, we succeeded in visualizing mesenchymal lineage cells using in vivo microimaging and immunohistochemistry. Flow cytometric analysis revealed CD140b (PDGFRβ) could be a specific marker for mesenchymal lineage cells. The results may reinforce the urgent need for a more comprehensive view of the mesenchymal stem cell identity and characteristics. ©AlphaMed Press.

本研究は、糖尿病患者の歯周病のスクリーニングテストとしての、歯周病原細菌に対する血清IgG抗体価(以下抗体価)の有用性を検索するために行った。被験者は、2010年7月から2011年12月までに慶應義塾大学病院内科に教育入院した2型糖尿病患者28名(平均年齢56.6±10.7歳、男性18名、女性10名、平均罹患期間8.7±6.3年)(平均±標準偏差)とした。初診時に歯周組織検査と血液検査を施行後、歯周基本治療を行い、基本治療終了1ヵ月後に再評価を行った。抗体価検査はPorphyromonas gingivalis(Pg)、Prevotella intermedia(Pi)、Eikenella corrodens(Ec)、Aggregatibacter actinomycetemcomitans(Aa)の4菌種に行った。今回検索した検査値の中では、Pg抗体価と歯周病の病態に関連が認められ、抗体価1.0を境界値とした場合に低抗体価群と高抗体価群では、歯周ポケット深さにおいて有意差を認めた。また初診時のPg抗体価と歯周ポケット深さにおいて、有意に高い相関関係を示した。基本治療後の抗体価は低下傾向にあるものの、初診時との有意差は認めなかった。以上の結果から、糖尿病患者の歯周病スクリーニングにPgに対する血清抗体価が有用であり、その境界値は1.0付近にあることが示唆された。(著者抄録)

症例は23歳女性で、右側顎下部の腫脹を主訴とした。同部に30×20mm大の限局性、可動性、弾性軟の無痛性腫瘤を認め、熱感や発赤はなかった。MRIで腫瘤はT1強調画像で不均一な低信号、T2強調画像で中〜高信号を示し、大部分でガドリニウム造影効果を認め、腫瘤の下方に正常な顎下腺が圧排されていた。顎下腺良性腫瘍と診断し、手術を行い顎下腺を含め一塊として切除した。術後2年10ヵ月経過し、再発や転移はない。病理組織所見で、病変は境界明瞭な腫瘤で、周囲に線維性の被膜様構造が認められた。腫瘍は紡錘形〜短紡錘形細胞の密な増殖から成り、細胞異型は軽度で、核分裂像は少なかった。腫瘍内には大小不整形の血管腔が相当数介在し、血管周皮腫様の鹿の角様に分岐した血管も認めた。切除標本の割面に散在していた小腔に相当する部分には、裏装上皮や血管内皮細胞は認めなかった。免疫染色ではCD34およびbcl-2が陽性で、孤立性線維性腫瘍と病理診断した。

本研究は糖尿病患者の歯周病罹患状況、ならびにその他の合併症との相互関係を明らかにすることを目的に行われた。被験者は、2010年7月から2011年12月までに内科に教育入院した2型糖尿病患者105名(平均年齢55.4±11.3歳)とした。評価項目として、現在歯数、プロービングポケットの深さ(PPD)、プロービング時の出血(BOP)、動揺度を測定した。また、背景因子として年齢・性別・体格指標(BMI)・糖尿病罹患期間・血圧・既往歴、糖尿病合併症に関する評価として網膜症の有無(SDR:単純性網膜症・PPDR:前増殖性網膜症・PDR:増殖性網膜症)、腎症の有無、神経障害の有無、動脈硬化性疾患の有無、血液指標を評価し比較検討した。今回の結果から糖尿病合併症である網膜症患者での残存歯数はPDR患者で他のステージの網膜症患者に比べ有意に少なく(p<0.01 vs SDR、p<0.05 vs PPDR)、4〜6mmPPD率や7mm以上PPD率ではSDR

埋伏智歯抜歯の難易度を安全性という観点から簡便に判断できる指標を探索するため、当科で2006〜2008年にパノラマX線撮影された埋伏智歯3789本の写真をもとに、埋伏状態と下歯槽管や上顎洞との位置関係について検討した。その結果、[埋伏の深さ]や[歯軸方向][萠出スペース]は上顎においてはあまり適切な指標とはいえないが、下顎においては抜歯のリスクを簡便に判断できる指標になると考えられた。

25歳女。左側下顎臼歯部歯肉腫脹および疼痛、左側オトガイ神経麻痺、右側上顎歯肉の腫脹で受診した。セフトリアキソンナトリウムの静脈内投与を開始した。激痛を伴っていたため、疼痛コントロール目的で入院した。ジクロフェナクナトリウムが無効であったが、硫酸モルヒネで良好な疼痛コントロールが得られた。生検による病理組織学的診断では炎症性病変もしくは形質細胞腫を疑った。抗菌薬は無効で、上下顎とも骨融解が急速に進行した。確定診断が得られなかったが、骨髄炎様病態を呈する顎骨腫瘍の診断で、全身麻酔下、上顎骨部分切除術、下顎骨区域切除術、再建用チタンプレートによる再建術を施行した。術後再発もなく、下顎欠損部に腸骨移植を施行した。術後約3年の現在、骨融解も停止し、自発痛もなく経過は良好である。病理組織学的に上下顎大量骨融解症と診断した。

生後4ヵ月の男児.患者は出生時より口底部の腫脹を認め,精査目的で著者らの施設へ紹介となった.初診時,口底右側部から正中を越える表面平滑な半球状の腫脹を認め,MRIでは口底正中部に約30×25mm大の境界明瞭なT1にて低信号,T2にて高信号の病変が顎舌骨筋の上方に認められた.以上より,先天性ガマ腫(舌下型)と診断のもと,生後7ヵ月時に開窓術を施行した.病理組織学的に粘液貯留嚢胞と診断され,術後1年3ヵ月経過現在,再発なく経過良好である

18歳女.歯列不正で受診した.パノラマX線写真で右側下顎智歯部にX線透過像を指摘され受診した.下顎骨嚢胞の臨床診断で,全身麻酔下嚢胞摘出術を予定した.術前検査でASTとALTが高値であった.肝生検を施行した.自己免疫性肝炎と診断し,プレドニゾロンを開始した.手術を延期していたが,右側頬部腫脹および右側下顎智歯部より排膿を認め,下顎骨嚢胞摘出術および智歯の抜歯術を施行した.病理診断は歯原性角化嚢胞であった.現在,術後約1年10ヵ月経過するも下顎骨嚢胞の再発はなく経過良好である

骨髄には多能性をもつ間葉系幹細胞が存在し、血球系細胞の増殖・分化を調節する一方で、成体間葉系組織の修復・恒常性の維持に寄与していると考えられている。しかしながら、間葉系幹細胞は現状においてin vitroにて定義されている幹細胞であり、このことが生体内での分布や、骨髄中での生理的機能の解析を困難にしている。そこで、フローサイトメトリーを用いて、予期的に間葉系幹細胞を同定・分離し、その性状を解析する試みが行われている。この方法を用いることで、性質変化や他細胞の影響のない均一な間葉系幹細胞を得ることが可能となり、これまで明らかにされてこなかった真の分化能、生体内における局在、あるいはその生理的機能を解明することができると考えられる。(著者抄録)